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嚙齒類(lèi)動(dòng)物顯性致死試驗儀

一、 儀器介紹

實(shí)驗目的：

本試驗是一項生殖細胞致突變試驗,用來(lái)檢測受試物對整體哺乳動(dòng)物生殖細胞的遺傳損傷,進(jìn)一步確證體外試驗或其他試驗系統獲得的陽(yáng)性結果,以評價(jià)受試物能否引起顯性致死突變。

實(shí)驗概述：

哺乳動(dòng)物發(fā)育中的精子在物理或化學(xué)因素作用下,發(fā)生染色體損傷,從而使受精卵在發(fā)育中死亡引起顯性致死的染色體損傷主要為染色體斷裂。顯性致死的主要表現是受精卵著(zhù)床前丟失或著(zhù)床后胚

胎早期死亡。通過(guò)適當的途徑使雄性動(dòng)物接觸受試物,然后與未經(jīng)染毒且未交配過(guò)的雌性動(dòng)物交配,交配結束后,取出雌性動(dòng)物。雌性動(dòng)物于妊娠后半期處死,剖開(kāi)腹腔,取出子宮,檢査兩側子宮內的胚胎植入數（著(zhù)床數）、早死胎、晚死胎和活胎數。雄性動(dòng)物每間隔一定時(shí)間再與另一批未經(jīng)染毒且未交配過(guò)的雌性動(dòng)物交配,如此共進(jìn)行數批,以保證覆蓋一個(gè)精子周期。

應用范圍

應用于科研、農業(yè)、衛生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個(gè)領(lǐng)域

符合標準：

GB/T 15670.18-2017《農藥登記毒理學(xué)試驗方法第18 部分:嚙齒類(lèi)動(dòng)物顯性致死試驗》

二、試驗流程

1）實(shí)驗動(dòng)物：

物種: 通常選用性成熟的健康雄性大鼠或小鼠（如SD大鼠、CD-1小鼠）

數量: 每組至少15只雄鼠，設多個(gè)劑量組和陰性/陽(yáng)性對照組。

雌鼠: 需未交配過(guò)的健康雌鼠，用于與雄鼠交配。

2）給藥劑量分組:

至少設3個(gè)劑量組，高劑量應出現輕微毒性（如體重減輕）。

陰性對照組如體重減輕（溶劑對照）和陽(yáng)性對照組（如環(huán)磷酰胺等已知致突變劑）

給藥方式:通常為經(jīng)口灌胃，連續給藥5~7天（覆蓋精子發(fā)生周期不同階段）

3）交配程序

交配安排:雄鼠給藥后，按周次與未處理雌鼠交配（每周更換一批雌鼠，共5~6批），以覆蓋精子發(fā)生全周期（精原細胞一精子）。

交配比例:通常1雄:2雌，每日檢查陰栓（交配證據）

4）觀(guān)察指標：

胚胎存活分析

雌鼠妊娠中期解剖，計數黃體數、著(zhù)床數、活胎數和死胎數。

計算顯性致死率:

其他指標: 雄鼠體重、睪丸重量、精子質(zhì)量等,

5）結果評價(jià)：

陽(yáng)性結果:顯性致死率顯著(zhù)升高（如劑量依賴(lài)性增加，或某批交配周期異常），提示受試農藥可能誘發(fā)生殖細胞遺傳損傷。

陰性結果:需結合其他遺傳毒性試驗綜合評估